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    說起來今天是一個(gè)很特別的日子，是十一月新的開始，在今天的新聞資訊里上海恒遠(yuǎn)給大家總結(jié)相關(guān)ELISA。不少朋友在問試劑盒供應(yīng)商哪家好？高質(zhì)量試劑盒體現(xiàn)在哪里？高靈敏性是ELISA方法的試劑盒特點(diǎn)之一，今天我們就圍繞著這一方面來細(xì)細(xì)解說，那么具zui高靈敏ELISA試劑盒來自哪里呢？
   

    經(jīng)過多種試驗(yàn)結(jié)果已證實(shí)，熒光酶聯(lián)免疫救贖具有很高的敏感性，但是若掌握不好也可帶來很高的背景染色，可有多種因素影響到zui終產(chǎn)物的酶結(jié)合位點(diǎn)的沉積，這是因?yàn)檫@個(gè)沉積過程是一種復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)和物理變化的綜合結(jié)果。在ELF的反應(yīng)過程中很容易形成假的熒光結(jié)晶，使FISH信號(hào)減弱，引起非特異性結(jié)晶沉積在組織細(xì)胞表面，造成背景信號(hào)，試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，只要延長ELF的反應(yīng)時(shí)間，就可以避免背景染色。
 

·熒光酶聯(lián)免疫技術(shù)避免背景染色的方法有3種。
 

1.商品化試劑盒內(nèi)提供一種延時(shí)試劑。
 

2.在顯色液中加入4%PVP。
 

3.顯色時(shí)間控制在15~30min內(nèi)。
    
    化學(xué)方法主要根據(jù)待測(cè)物與其他物質(zhì)的化學(xué)反應(yīng)、產(chǎn)生顏色變化來進(jìn)行。該方法是zui早用于定量測(cè)定生物體內(nèi)微量有機(jī)物質(zhì)的基本方法。但因其檢出的靈敏度低(要求采樣很多)、特異性差，而且操作麻煩，因此也不利于推廣應(yīng)用。
 

·如何分辨所購高靈敏ELISA試劑盒是否能測(cè)血清血漿樣本呢?
 

根據(jù)上海恒遠(yuǎn)技術(shù)部分析，具體有以下幾點(diǎn)說明：
 

1.如廠家沒有提供專門用于血清血漿樣本的緩沖液，那么只要用已知濃度的待測(cè)指標(biāo)蛋白加入所測(cè)種屬的血清作為樣本加樣和用已知濃度的待測(cè)指標(biāo)蛋白加入PBS緩沖液中同時(shí)檢測(cè)對(duì)比，即可知道該試劑盒是否可以直接用來測(cè)血清血漿樣本。
 

2.如廠家沒有提供專門用于血清血漿樣本的緩沖液，只是有一個(gè)籠統(tǒng)的或統(tǒng)一的稀釋液，那么只要用已知濃度的待測(cè)指標(biāo)蛋白加入所測(cè)種屬的血清直接加樣和用已知濃度的待測(cè)指標(biāo)蛋白加入廠家提供的統(tǒng)一的緩沖液中同時(shí)檢測(cè)，也可得出該試劑盒是否可直接用來檢測(cè)血清血漿樣本。
 

3.如廠家提供專門用于血清血漿樣本的緩沖液，可用已知濃度的待測(cè)指標(biāo)蛋白加入所測(cè)種屬的血清直接加樣和用緩沖液按說明書分別加樣，也可得出結(jié)果。
   

    如該種類型試劑盒樣本總量如為100μl的話，一般而言，會(huì)是50μl的樣本加樣量和50μl的特定的緩沖液。
   

    在使用試劑盒的過程，可將已知濃度的蛋白用血清或血漿調(diào)配到試劑盒標(biāo)定的檢測(cè)限的zui高值的2倍，加入50μl做兩孔，一孔補(bǔ)入常規(guī)的50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，一孔補(bǔ)入50μl樣本分析緩沖液，即可區(qū)分出效果來，有時(shí)候，有些廠家為了達(dá)到“消除”的效果，在樣本分析緩沖液中加入待測(cè)目標(biāo)蛋白，為了鑒別出這種情況，也可直接加入樣本分析緩沖液做一孔，同時(shí)做對(duì)比，這樣可試出高靈敏ELISA試劑盒中的針對(duì)血清血漿樣本的緩沖液是否真的有效。